Библиографическое описание:
Черникевич, И. П. Исследование топографии активного центра тиаминкиназы головного мозга свиньи с использованием флуоресцентных зондов / И. П. Черникевич, Е. В. Кравец, Е. Н. Хильманович // Журнал Гродненского государственного медицинского университета. – 2018. – Т. 16, № 4. – С. 440-446.
Abstract:
Введение. Биосинтез коферментной формы витамина В1 –тиаминдифосфата – осуществляется тиаминкиназой (КФ 2.7.6.2), механизм и пути регуляции которого могут существенно проясниться после выяснения
структурной организации активного центра фермента, его конформационной подвижности.
Цель. Исследование топографии активного центра тиаминкиназы, локальных конформационных перестроек, ответственных за функционирование белка.
Материал и методы. Исследования выполнены на электрофоретически гомогенных препаратах фермента головного мозга свиньи с использованием в качестве зондов 2-толуидинонафталин-6-сульфоната и 1-анилинонафталин-8-сульфоната.
Результаты. Установлено, что активный центр тиаминкиназы представляет гидрофобную полость, в которой тиамин и АТФ сорбируются пиримидиновым и адениновым циклами, а дифосфатный радикал субстрата-донора направлен в сторону субстрата-акцептора. Пируват связывается вблизи места локализации тиамина и облегчает отщепление тиаминдифосфата. Ионы металлов определяют оптимальную геометрию сорбции субстратов и, очевидно, способствуют их сближению. Предложена модель организации
каталитического центра тиаминкиназы.
Выводы. Участки сорбции субстратов, кофакторов и эффекторов в молекуле фермента пространственно разделены. Взаимодействие их осуществляется путем конформационной перестройки глобулы.
.png)