Способ определения гомоцистеина и других тиолсодержащих соединений в животных тканях

Abstract

Способ определения гомоцистеина, цистеина, цистеинилглицина, гаммаглутамилцистеина и глутатиона в животных тканях, при котором осуществляют пробоподготовку, при этом в среду для гомогенизации предварительно вносят трис(2-карбоксиэтил)фосфин гидрохлорид и N-ацетилцистеин в качестве внутреннего стандарта, затем добавляют в пробу раствор трихлоруксусной кислоты, пробу центрифугируют, в полученный супернатант вносят аммоний-7-фторбензол-2-оксо-1,3-диазола-4-сульфонат для дериватизации тиолов, полученную смесь инкубируют, нейтрализуют и осуществляют ее анализ методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с детектированием по флуоресценции в режиме градиентного элюирования с изократическим этапом в начале разделения, при этом разделение осуществляют на колонке, содержащей обращенно-фазовый сорбент, допускающий работу с нулевой концентрацией органического модификатора, с использованием фосфатного буфера с величиной pH ниже 3,5, после чего определяют концентрацию целевых соединений методом внутреннего стандарта. Изобретение относится к биохимии и может быть использовано для определения гомоцистеина и других низкомолекулярных серосодержащих соединений в животных тканях в лабораторных биохимических исследованиях.